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1.研究对象
本实验已经延边大学临床学院伦理委员会批准,所有患者无O3-AHT禁忌症,病人或授权人签署臭氧治疗知情同意书。选择2014年10月~2015年1月间收入我院疼痛科住院的PHN患者40例,随机分成实验组及对照组,实验组 21例,男性 9 例,女性12例,年龄48~85岁,平均年龄(66.57±10.81)岁,病程 1~12月,平均病程(2.76±2.95)月,治疗前VAS评分5.43±0.98;对照组19例,男性 8例,女性11例,年龄 44~87岁,平均年龄(63.84±11.30)岁,病程 1~12月,平均病程(2.57±3.29)月,治疗前VAS评分5.47±1.07,两组患者性别、年龄、病程、治疗前疼痛程度上无统计学差异(P>0.05)。
2.臭氧大自血回输疗法
在治疗室内,开放患者上肢较粗的静脉通道,连接装有输血用枸橼酸钠10ml的输血器、O3-AHT专用真空瓶,真空瓶另一端连接德国佐斯曼OZON2000型高压臭氧治疗仪,待真空瓶内患者血液收集至200ml时,由臭氧治疗仪制取一定精度的O3气体(初次为25ug/ml,逐次递增5ug/ml,直至到达35ug/ml)。将O3气体压入真空瓶内与血液进行混合融合(此时血液由暗红色变为鲜红色)约2~3分钟。打开臭氧专用Y双通输血器回输开关,将经过O3气体融合处理的血液回输至人体,O3-AHT完成,整个O3-AHT治疗过程控制在8~10分钟内完成为佳。因臭氧的半衰期约20分钟,其在机体内还有12~14分钟时间随循环血液反复多次地到达机体的各个组织部位(红体字拟删除可否)。O3-AHT隔日1次,10次为一个疗程。
3.实验方法及步骤
患者入院采血后均行常规治疗。包括口服抗抑郁、抗癫痫、阿片类药物:阿米替林(12.5~25mg/晚)、普瑞巴林胶囊(150mg/12h)、氨酚羟考酮片(1片/8h);改善微循环及神经营养用药:注射用前列地尔(优帝尔)干乳剂(10ug/日1次静脉输注)、注射用腺苷钴胺粉针(1.5mg/日1次肌肉注射);神经阻滞(0.5%利多卡因20ml日1次)和/或射频治疗(42℃脉冲射频或45℃~70℃射频热凝)。实验组所有患者除完成常规治疗外,从入院之日起即开始1个疗程的O3-AHT。对照组患者只接受常规疗法。
所有实验组及对照组病例均于入院前1天晚间做好禁食水准备,在住院当天清晨未行治疗前,使用采血管采集患者血样3~5ml,作为治疗前样本,立即用离心机在3000r/min的转速下离心15min,然后收集离心后获得的上层血清作为检测样本,编号后放入-80℃的超低温冷冻储存箱内储存,以备样本集齐后同批检测。
实验组患者均于完成第1次、5次及10次O3-AHT10min后,使用采血管收集血样3~5ml。对照组患者于治疗1d、10d及15d使用采血管收集血样3~5ml。上述所有血样采集后,均立即用离心机在3000r/min的转速下离心15min,然后收集离心后获得的上层血清作为检测样本,编号后放入-80℃的超低温冷冻储存箱内储存,以备样本集齐后同批检测。
所有血样收集完毕后,同批进行IL-2和IL-6检测。所用IL-2和IL-6放射免疫分析试剂盒均购于北京北方生物技术研究所,IL-2和IL-6的检测采用放射免疫测定法,操作过程严格按照说明书进行。
4.观察指标
检测实验组和对照组治疗前、治疗1d、10d和20d时的血样中IL-2和IL-6的水平。
5.统计学方法
采用 SPSS 17.0 统计软件(SPSS 公司,美国)进行统计分析,所有试验数据均以均数±标准差(±SD) 表示,计量资料采用重复测量的双因素方差分析、多变量方差分析及t检验,计数资料采用卡方检验进行统计处理,以P< 0.05 为差异有统计学意义。
PHN是HZ迁延不愈,侵犯感觉神经系统,引起其不可逆的损伤,从而导致长期剧烈疼痛的一种综合征[12]。机体内对抗水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus, VZV)的免疫机制主要是细胞免疫,而介导机体内细胞免疫最重要的细胞就是T淋巴细胞群。
活化的Th1细胞分泌IL-2,具备多种生物学活性。它能够维持活性T细胞增生及促进自然杀伤(natural killer, NK)细胞增殖与分化,增强其溶解及破坏靶细胞之功能,并且能促进产生、释放抗体和干扰素,具有广谱的辅助体液免疫和细胞免疫的作用[13]。汪红卫[14]等对83例PHN和77例HZ患者的IL-2水平检测比较,结果显示前者IL-2水平明显低下,认为IL-2的减少是PHN患者免疫紊乱,导致其发病的主要原因。因此增加Th1细胞数量、改善Th1细胞功能,促进IL-2分泌对PHN疾病的转归及康复具有重要意义。
Th2细胞产生细胞因子IL-6,可诱导巨核细胞成熟,参与体液免疫。机体在正常生理条件下,IL-6处于低含量水平,对神经系统有促进其正常发育与修复的功能。但高含量水平的IL-6,能引发神经系统的损害[15]。陈大伟[16]等对25例PHN和29例HZ患者血清IL-6的含量检测发现前者IL-6水平明显高于后者,证实HZ患者血清IL-6的水平与PHN的发生[17]、神经损伤程度以及痛区冷觉缺失程度呈正相关。对于PHN患者抑制Th2细胞增殖及功能,降低IL-6水平有利于疾病的恢复[18]。
本研究通过对比联合O3-AHT治疗与常规疗法,结果表明:(1)常规治疗对PHN患者IL-2水平无影响,这说明常规治疗无免疫调节作用,不能提高患者的免疫力,与近期许多文献提出的神经阻滞可治疗PHN,但对免疫功能无影响的观点相一致[19-21]。而在一个疗程内联合O3-A治疗患者血清IL-2水平的升高与其血疗的次数呈正相关。(2)常规治疗和联合O3-A治疗10d内具有显著降低PHN患者IL-6水平的疗效,10d后IL-6的水平不随治疗时间的延长而降低。
综上所述,联合O3-AHT治疗能显著提高PHN患者血清IL-2水平、降低血清IL-6水平,其作用机制可能为:一定浓度(20~40µg/ml)的臭氧与血液混合后产生过氧化氢(H 2 O 2),它作为一个重要信使可激活人体免疫系统,引发一系列化学反应,诱导机体产生IL-2、干扰素等细胞因子,干扰素能够抑制Th2细胞,促使IL-6分泌减少,达到调节免疫系统的作用 [22]。对PHN这种因免疫失衡引起的疾病,臭氧通过调节免疫细胞数量的平衡及相关细胞因子的水平恰能达到治疗的目的[23-25]。
 
 

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